Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Для приготовления суспензии бактериальных культур и культуры Candida albicans микробную массу смывают с питательной среды стерильной суспендирующей жидкостью, содержащей 9 г/л натрия хлорида Р и 0,1 г/л пептона Р, и переносят в подходящий сосуд. Затем с помощью той же жидкости доводят содержание микроорганизмов до 108 в миллилитре. Для приготовления суспензии для рассеивания и переноса поверхностного роста в подходящий сосуд. Добавляют культуры Aspergillus niger используют стерильную суспендирующую жидкость, содержащую 0,9 г/л хлорида натрия Р и 0,5 г/л полисорбата 80 Р, и с ее помощью доводят содержание спор до приблизительно 108 в одном миллилитре.
Из каждой суспензии немедленно отбирают подходящий образец и определяют число колониеобразующих единиц в 1 мл (КОЭ/мл) каждой суспензии методом прямого посева на чашки или методом мембранной фильтрации (2.6.12). Полученное значение служит для определения числа жизнеспособных микроорганизмов в инокуляте и сходного числа микроорганизмов при проведении испытания. Инокулят следует использовать немедленно после приготовления.
МЕТОДИКА
Для подсчета жизнеспособных микроорганизмов в инокулированных образцах используют ту же плотную питательную среду, которая была использована для первоначального выращивания соответствующих микроорганизмов.
Необходимо инокулировать каждый из контейнеров с испытуемым лекарственным средством суспензией одного из тест-микроорганизмов до концентрации 105-106 КОЭ в 1 мл или 1 г лекарственного средства. Объем суспензии должен составлять не более 1% от объема образца. Образец тщательно перемешивают для обеспечения равномерного распределения микроорганизмов.
Инокулированные образцы лекарственного средства выдерживают при температуре 20-25°С в защищенном от света месте. Из каждого испытуемого образца отбирают пробы (обычно 1 мл или 1 г) непосредственно после инокуляции и через указанные интервалы времени (см. Таблицы 5.1.3-1/2/3) определяют число жизнеспособных микроорганизмов методом посева на чашки или методом мембранной фильтрации (2.6.12). Антимикробную активность готового лекарственного средства следует устранить путем разведения, фильтрации или с помощью подходящего инактиватора. При использовании инактиватора следует подтвердить путем контрольных опытов, что его присутствие не влияет на жизнеспособность микроорганизмов. Следует подтвердить пригодность методики для доказательства требуемого снижения числа жизнеспособных микроорганизмов.
КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ АНТИМИКРОБНЫХ КОНСЕРВАНТОВ
Критерии оценки антимикробной активности приведены в Таблице 5.1.3.-1/2/3 в виде логарифма уменьшения числа жизнеспособных микроорганизмов.
Таблица 5.1.3.-1. - Лекарственные средства для парентерального и офтальмологического применения
Lg уменьшения
6 24 7 сут 14 сут 28 сут
часов часа
Бактерии А 2 3 - - НВ*
В - 1 3 - Ну**
Грибы А - - 2 - НУ
В - - - 1 НУ
* НВ:нет выявления ** НУ: нет увеличения
Критерий А соответствует рекомендованной эффективности. Если обосновано, что критерий А не может быть достигнут, например, по причине повышенного риска неблагоприятных воздействий, лекарственное средство должно удовлетворять критерию В.
Таблица 5.1.3.-2. - Лекарственные средства для местного применения
Lg уменьшения
2 сут 7 сут 14 сут 28 сут
Бактерии А 2 3 - НУ
В - - 3 НУ
Грибы А - - 2 НУ
В - - 1 НУ
Критерий А соответствуют рекомендованной эффективности. Если обосновано, что критерий А не может быть достигнут, например, по причине повышенного риска неблагоприятных воздействий, лекарственное средство должно удовлетворять критерию В.
Таблица 5.1.3.-3.- Лекарственные средства для орального применения
Lg уменьшения
14 сут 28 сут
Бактерии 3 НУ
Грибы 1 НУ
Приведенный критерий соответствуют рекомендованной эффективности.
5.1.4. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
При производстве, упаковке, хранении и продвижении готовых лекарственных средств должны быть приняты соответствующие меры для обеспечения их микробиологической чистоты. К готовым лекарственным средствам рекомендуется предъявлять требования, приведенные ниже.
Категория 1
Готовые лекарственные средства, к которым предъявляется требование по стерильности, применяемые в дозированной форме и другие готовые лекарственные средства, маркированные как стерильные.
- Должны выдерживать испытание на стерильность (2.6.1).
Категория 2
Готовые лекарственные средства для местного применения и ингаляционного применения, за исключением тех, к которым предъявляются требования по стерильности, и трансдермальные пластыри.
- Общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) не более 102 в 1 г, в 1 мл или на 1 пластырь (включая клеевую основу и подложку), (2.6.12).
